Hvað er pólýakrýlamíð gel rafdráttur?

Pólýakrýlamíð hlaup rafskaut

Gel rafdráttur er grundvallartækni í rannsóknarstofum þvert á líffræðilegar greinar, sem gerir kleift að aðskilja stórsameindir eins og DNA, RNA og prótein. Mismunandi aðskilnaðarmiðlar og aðferðir gera kleift að aðgreina undirmengi þessara sameinda á skilvirkari hátt með því að nýta eðliseiginleika þeirra. Sérstaklega fyrir prótein er pólýakrýlamíð hlaup rafskaut (PAGE) oft sú tækni sem valið er.

1

PAGE er tækni sem aðskilur stórsameindir eins og prótein byggt á rafhleðslu hreyfanleika þeirra, það er getu greiniefna til að fara í átt að rafskauti með gagnstæða hleðslu. Í PAGE er þetta ákvarðað af hleðslu, stærð (mólþunga) og lögun sameindarinnar. Greiningarefni fara í gegnum svitaholur sem myndast í pólýakrýlamíðgeli. Ólíkt DNA og RNA eru prótein mismunandi í hleðslu eftir amínósýrunum sem eru innbyggðar, sem getur haft áhrif á hvernig þær ganga. Amínósýrustrengir geta einnig myndað aukabyggingar sem hafa áhrif á stærð þeirra og þar af leiðandi hvernig þeir geta farið í gegnum svitaholurnar. Það getur því stundum verið æskilegt að denaturera prótein fyrir rafskaut til að línugreina þau ef nákvæmara mat á stærð er krafist.

SDS SÍÐA

Natríum-dódecýl súlfat pólýakrýlamíð hlaup rafdráttur er tækni sem notuð er til að aðskilja próteinsameindir með massa 5 til 250 kDa. Próteinin eru aðskilin eingöngu á grundvelli mólþyngdar þeirra. Natríumdódecýlsúlfati, anjónískt yfirborðsvirkt efni, er bætt við við framleiðslu gela sem hylja innri hleðslu próteinsýnanna og gefur þeim svipað hlutfall hleðslu og massa. Í einföldum orðum, það eyðir próteinin og gefur þeim neikvæða hleðslu.

2

Native PAGE

Native PAGE er tækni sem notar óafnegð hlaup til að aðskilja prótein. Ólíkt SDS PAGE er engu eðlismengunarefni bætt við við gerð hlaupa. Þar af leiðandi fer aðskilnaður próteina fram á grundvelli hleðslu og stærð próteina. Í þessari tækni eru sköpulag, felling og amínósýrukeðjur próteina þeir þættir sem aðskilnaðurinn er háður. Próteinin skemmast ekki í þessu ferli og hægt er að endurheimta þau eftir að aðskilnaður er lokið.

3

Hvernig virkar pólýakrýlamíð gel rafdráttur (PAGE)?

Grunnreglan í PAGE er að aðskilja greiniefni með því að fara í gegnum svitaholur pólýakrýlamíðhlaups með rafstraumi. Til að ná þessu er akrýlamíð-bisakrýlamíð blanda fjölliðuð (pólýakrýlamíð) með því að bæta við ammoníum persúlfati (APS). Hvarfið, sem er hvatað af tetrametýletýlendíamíni (TEMED), myndar netlíka uppbyggingu með svitaholum sem greiniefni geta hreyft sig í gegnum (Mynd 2). Því hærra sem hlutfall heildarakrýlamíðs er innifalið í hlaupinu, því minni er svitaholastærðin, því minni eru próteinin sem geta farið í gegnum. Hlutfall akrýlamíðs og bisakrýlamíðs mun einnig hafa áhrif á svitaholastærð en því er oft haldið stöðugu. Minni holastærðir draga einnig úr hraðanum sem lítil prótein geta flutt í gegnum hlaupið, bæta upplausn þeirra og koma í veg fyrir að þau renni hratt út í biðminni þegar straumur er beitt.

3-1

Búnaður fyrir pólýakrýlamíð hlaup rafskaut

Gel raforkufrumur (geymir/hólf)
Geymirinn fyrir pólýakrýlamíð hlaup rafdrætti (PAGE) er frábrugðinn agarósa gel tankinum. Agarósa hlauptankurinn er láréttur en PAGE tankurinn er lóðréttur. Með lóðréttri rafdrætti (tank/hólf) er þunnu hlaupi (venjulega 1,0 mm eða 1,5 mm) hellt á milli tveggja glerplötur og komið fyrir þannig að botn hlaupsins er á kafi í biðminni í einu hólfinu og toppurinn er á kafi í biðminni. í öðru herbergi. Þegar straumur er beitt flyst lítið magn af stuðpúða í gegnum hlaupið frá efsta hólfinu í neðsta hólfið. Með sterkum klemmum til að tryggja að samsetningin haldist í uppréttri stöðu, auðveldar búnaðurinn hröð hlauphlaup með jafnri kælingu sem leiðir til aðgreindra bönda.

4

Beijing Liuyi Biotechnology Co., Ltd. (Liuyi Biotechnology) framleiðir úrval af stærðum af pólýakrýlamíð hlaup rafdrætti frumum (geymar/hólfa). Líkönin DYCZ-20C og DYCZ-20G eru lóðréttar rafdrættisfrumur (tankar/hólf) fyrir DNA raðgreiningu. Sumar af lóðréttu rafskautsfrumunum (geymar/hólf) eru samhæfðar flekakerfi, eins og DYCZ-24DN, DYCZ-25D og DYCZ-25E eru samhæfar við Western Blotting kerfi líkan DYCZ-40D, DYCZ-40G og DYCZ-40F, sem eru notuð til að flytja próteinsameindina úr hlaupinu yfir á himnuna. Eftir SDS-PAGE rafdrætti er Western Blotting tækni til að greina ákveðið prótein í próteinblöndu. Þú getur valið þessi blettakerfi í samræmi við tilraunakröfur.

6

Rafmagnsaflgjafi
Til að útvega rafmagn til að keyra hlaupið þarftu rafskaut aflgjafa. Hjá Liuyi líftækni bjóðum við upp á úrval raffóruaflgjafa fyrir öll forrit. Líkanið DYY-12 og DYY-12C með mikilli stöðugri spennu og straumi getur uppfyllt háspennuþörf rafdrátt. Það hefur það hlutverk að standa, tímasetningu, VH og skref-fyrir-skref notkun. Þau eru tilvalin fyrir IEF og DNA raðgreiningu rafdrætti. Fyrir almenna prótein- og DNA rafdrætti, höfum við líkanið DYY-2C, DYY-6C, DYY-10, og svo framvegis, sem eru einnig heitar söluaflgjafar með rafdrættisfrumum (tankar/hólf). Þetta er hægt að nota fyrir mið- og lágspennu rafdrætti, svo sem til notkunar í skólastofu, sjúkrahúsastofu og svo framvegis. Fleiri gerðir fyrir aflgjafa, vinsamlegast farðu á heimasíðu okkar.

7

Liuyi vörumerkið á sér meira en 50 ára sögu í Kína og fyrirtækið getur veitt stöðugar og hágæða vörur um allan heim. Með margra ára þróun er það verðugt að eigin vali!

Fyrir frekari upplýsingar um okkur, vinsamlegast hafðu samband við okkur með tölvupósti[varið með tölvupósti] or [varið með tölvupósti].

Tilvísanir í Hvað er pólýakrýlamíð hlaup rafskaut?
1. Karen Steward PhD pólýakrýlamíð hlaup rafskaut, hvernig það virkar, tækniafbrigði og notkun þess


Birtingartími: 23. maí 2022