Fínstilling á hlauprafmagni: Bestu aðferðir fyrir sýnishorn, spennu og tímasetningu

Inngangur

Gel rafdráttur er grundvallartækni í sameindalíffræði, mikið notuð til að aðskilja prótein, kjarnsýrur og aðrar stórsameindir. Rétt eftirlit með rúmmáli sýna, spennu og rafskautstíma skiptir sköpum til að ná nákvæmum og endurtakanlegum niðurstöðum.Samstarfsmaður okkar í rannsóknarstofu býður upp ábestu starfsvenjur til að stjórna þessum breytum við SDS-PAGE hlaup rafskaut.

3

Beijing Liuyi Líftækni hlaup rafdráttarvörur

Sýnismagn: Tryggir samræmi

Þegar þú framkvæmir SDS-PAGE rafdrætti er magn sýna lykilatriði sem getur haft veruleg áhrif á upplausn niðurstaðna þinna. Almennt er mælt með því að hlaða 10 µL af heildarpróteini í hverri brunn. Til að tryggja samkvæmni og koma í veg fyrir dreifingu sýna milli aðliggjandi brunna er mikilvægt að hlaða jöfnu rúmmáli af 1x hleðslubuffi í allar tómar holur. Þessi varúðarráðstöfun hjálpar til við að koma í veg fyrir að sýni dreifist á nærliggjandi brautir, sem getur átt sér stað ef holan er skilin eftir tóm.

Áður en sýnin eru hlaðin skaltu alltaf byrja á því að bæta mólþyngdarmerki við eina brunn. Þetta gerir kleift að auðkenna próteinstærð eftir rafskaut.

1

Spennustýring: Jöfnunarhraði og upplausn

Spennan sem notuð er við rafdrætti hefur bein áhrif á bæði hraðann sem sýni flytjast í gegnum hlaupið og upplausn aðskilnaðarins. Fyrir SDS-PAGE er ráðlegt að byrja með lágspennu um 80V. Þessi upphaflega lágspenna gerir sýnunum kleift að flytja hægt og jafnt og einbeita þeim í skarpt band þegar þau fara inn í skiljuhlaupið.

Þegar sýnin eru komin að fullu í skiljuhlaupið er hægt að auka spennuna í 120V. Þessi hærri spenna flýtir fyrir flutningnum og tryggir að próteinin séu skilvirk aðskilin í samræmi við mólþyngd þeirra. Nauðsynlegt er að fylgjast með framvindu brómófenólbláa litarefnisins, sem gefur til kynna að rafdrættinum sé lokið. Fyrir gel með styrkleika 10-12% nægja venjulega 80-90 mínútur; Hins vegar, fyrir 15% gel, gætir þú þurft að lengja keyrslutímann aðeins.

Tímastjórnun: Að vita hvenær á að hætta

Tímasetning er annar mikilvægur þáttur í hlaup rafdrætti. Að keyra hlaupið í of langan eða of stuttan tíma getur leitt til óákjósanlegra aðskilnaðar. Flutningur brómófenól bláa litarins er gagnlegur vísbending: þegar það nær botni hlaupsins er venjulega kominn tími til að stöðva hlaupið. Fyrir staðlað gel, eins og 10-12%, er rafdráttartími um það bil 80-90 mínútur venjulega fullnægjandi. Fyrir hærra hlutfall af gel, eins og 15%, ætti að lengja keyrslutímann til að tryggja algjöran aðskilnað próteina.

Buffer Management: Endurnotkun og undirbúningur buffers

Hægt er að endurnýta raffórunarstuðpúða 1-2 sinnum, allt eftir sérstökum aðstæðum rannsóknarstofu þinnar. Hins vegar, til að ná sem bestum árangri, er mælt með því að útbúa ferskt 10x biðminni og þynna það rétt fyrir notkun. Þetta tryggir að stuðpúðinn haldi virkni sinni, sem leiðir til áreiðanlegra niðurstaðna rafdráttar.

2

Beijing Liuyi Líftækni hlaup rafdráttarvörur

Með því að stjórna sýnisrúmmáli, spennu og rafskautstíma vandlega geturðu bætt nákvæmni og endurgerðanleika hlauprafnámsniðurstaðna umtalsvert. Að innleiða þessar bestu starfsvenjur í rannsóknarstofuvinnunni mun hjálpa þér að ná skýrari og greinilegri böndum, sem leiðir til betri gagna fyrir niðurstreymisgreiningu.

Ef þú hefur fleiri góðar aðferðir til að hámarka hlaup rafskaut tilraunir, velkomið að ræða við okkur!

Beijing Liuyi Líftækni Co. Ltd (Liuyi Líftækni) hefur sérhæft sig í framleiðslu á rafskautatækjum í meira en 50 ár með okkar eigin faglegu tækniteymi og R&D miðstöð. Við höfum áreiðanlega og fullkomna framleiðslulínu frá hönnun til skoðunar, og vöruhús, auk markaðsaðstoðar. Helstu vörur okkar eru Electrophoresis Cell (geymir/hólf), Electrophoresis Power Supply, Blue LED Transilluminator, UV Transilluminator, Gel Image & Analysis System o.fl. Við útvegum einnig rannsóknarstofutæki eins og PCR tæki, hvirfilblöndunartæki og skilvindu fyrir rannsóknarstofu.

Ef þú ert með einhverja innkaupaáætlun fyrir vörur okkar skaltu ekki hika við að hafa samband við okkur. Þú getur sent okkur skilaboð í tölvupósti[varið með tölvupósti]eða[varið með tölvupósti], eða vinsamlegast hringdu í okkur í +86 15810650221 eða bættu við Whatsapp +86 15810650221, eða Wechat: 15810650221.

Vinsamlegast skannaðu QR kóðann til að bæta við á Whatsapp eða WeChat.

2


Birtingartími: 20. ágúst 2024