Tilraun til að aðskilja sermisprótein með sellulósaasetathimnu raffóru

Meginregla

Sellulósa asetat filmu rafdráttur er rafdráttaraðferð sem notar sellulósa asetat filmu sem stuðning. Fyrirbærið þar sem hlaðnar agnir færast í átt að gagnstæða rafskautinu undir áhrifum rafsviðs er kallað rafskaut. Þar sem hvert prótein hefur ákveðinn jafnrafmagnspunkt, ef prótein er sett í lausn með pH lægra en jafnrafmagnspunktur þess, verður próteinið jákvætt hlaðið og færist í átt að neikvæðu rafskautinu. Þvert á móti færist það í jákvæða pólinn. Vegna þess að hraði próteinsameinda sem hreyfast í rafsviði tengist hleðslu þeirra, lögun og stærð sameindanna, er hægt að aðskilja mismunandi prótein með rafdrætti. Sermi inniheldur margs konar prótein, sem öll hafa jafnrafmagnspunkta við pH7,5 eða minna. Þegar sermi er sett í pH 8,6 biðminni til að keyra rafdrætti eru öll sermi prótein neikvætt hlaðin og munu færast í átt að jákvæðu hliðinni í rafsviðinu. Þar sem ýmis sermisprótein hafa mismunandi hleðslu við sama pH, eru sameindaagnirnar mismunandi að stærð og því er flæðishraðinn mismunandi og þær aðskildar með rafdrætti. Rafmagnspunktar og mólþyngd sermispróteina eru sýnd í töflunni hér að neðan:

Tilraunin er að aðskilja mismunandi prótein í blóðsermi með sellulósa asetat himnu (skammstöfun CAM) sem stuðningsefni. CAM er eins konar froðuð lausekvikmynd með góðri samræmdu, og þykktin er 0,1 mm-1,5 mm, sem hefur ákveðna vatnsgleypni.

Efni, tæki og hvarfefni fyrir CAM rafskaut

Sýnishorn:heilbrigt mannsblóðsermi

Hljóðfæri:aflgjafi DYY-6C, rafdrætti tankur DYCP-38C, frábær sýnishleðsla WD-9404

Hvarfefnin

1) sellulósa asetat himna 7X9cm

2) PH 8,6 barbitól stuðpúðalausn (jónastyrkur 0,05-0,09, það er 0,06 tími). allt að 1000ml;

3) Blettur: Ponceau S 0,2g, Trichloroacetic 3g, bætið við 100ml eimuðu vatni;

4) TBS/T eða PBS/T: 45ml 95% etanól, 5ml ísediksýra, bætið við 50ml eimuðu vatni;

5) Hreinsunarlausn: 70ml vatnsfrítt etanól, 30ml ísediksýra.

Tilraun Method

1) Undirbúðu himnuna: Dýfðu himnunni ofan í barbitol bufferlausnina 30mín-8klst, taktu hana út, fjarlægðu aukalausnina með gleypnum pappír.

2) Hleðsla sýnis: Aðgreina grófu hliðina og sléttu hlið himnunnar og merktu línu í 1,5 cm fjarlægð að efsta endanum á grófu hliðinni. Hlaðið sýnum með frábæru sýnishleðslutæki á grófu hliðinni. Athugið: Sýnin ættu að vera hlaðin á grófu hlið himnunnar. Eftir að sermisýnin eru komin að fullu inn í himnuna, snúðu himnunni við, settu grófu hliðina (með sýnum) niður að tankinum og endinn með sýnum er settur í neikvæða rafskaut.

3) Rafskaut: Kveiktu á aflgjafanum, 0,4～0,6m A/cm himna, hlauptími er 30-45 mín. Slökktu á rafmagninu eftir að hafa keyrt rafskaut.

4) Blettið og hreinsið: Takið himnuna úr tankinum og dýfið henni íit í litarlausnina í 5 mín, og hreinsaðu hana síðan í hreinsilausninni aftur og aftur í 3-4 sinnum þar til bakgrunnsliturinn er skýr. Sermispróteinin ættu að vera sýnd á böndunum og venjulega eru fimm svæði, mynda efsta enda á merktu línunni, albúmín, α1-glólín, α2-glólín, β-glólín, γ-glólín.

5) Varðveisla: setja þurra rafhlöðuhljómsveití hreinsilausn í 10-15 mínútur og taktu hana síðan út og haltu henni á hreint gler, eftir að það þornar verður það gagnsæ filmahljómsveit.

TilraunNiðurstaða

Aðskilnaðaráhrif sermissýna eru góð og það er ekkert fyrirbæri sem tengist bandi. Endurtekningarhæfni niðurstaðna er breytileg eftir prófunaraðferðum og aðferðum tilraunamannsins og endurtekningarnákvæmni er mikil.

Niðurstaða

Hraða klíníska rafdrætti uppgötvunarkerfið (RafmagnsgeymirDYCP-38C,aflgjafaDYY-6C og frábær sýnishleðsla WD-9404) framleidd af okkarfyrirtæki Beijing Liuyi Biotechnology Co., Ltduppfyllir tilraunakröfur,ogniðurstöðurnar eru endurskapanlegar, einfaldar og fljótlegar, hentugur fyrirkennslurannsóknir.

Beijing LiuyiBiotechnology Co., Ltd sérhæfir sig í framleiðslu á rafeindatækni fyrir lífvísindaiðnað, semhefur meira en 50 ára sögu í Kína og fyrirtækið getur veitt stöðugar og hágæða vörur um allan heim. Í gegnum áralanga þróun er það verðugt að eigin vali!

Við erum nú að leita að samstarfsaðilum, bæði OEM rafdrættisgeymir og dreifingaraðilar eru velkomnir.

Fyrir frekari upplýsingar um okkur, vinsamlegast hafðu samband við okkur með tölvupósti[varið með tölvupósti]eða[varið með tölvupósti].