Comet Assay (Single Cell Gel Electrophoresis, SCGE) er næm og hröð tækni sem er fyrst og fremst notuð til að greina DNA skemmdir og gera við í einstökum frumum. Nafnið „Comet Assay“ kemur frá hinni einkennandi halastjörnulíku lögun sem kemur fram í niðurstöðunum: kjarni frumunnar myndar „hausinn“ á meðan skemmdu DNA-bútarnir flytjast til og mynda „hala“ sem líkist halastjörnu.
Meginregla
Meginreglan í Comet Assay er byggð á flutningi DNA brota í rafsviði. Ósnortið DNA er áfram innan frumukjarnans, á meðan skemmd eða sundruð DNA flyst í átt að forskautinu og myndar „hala halastjörnunnar“. Lengd og styrkleiki hala er í réttu hlutfalli við umfang DNA skemmda.
Málsmeðferð
- Frumuundirbúningur: Frumur sem á að prófa er blandað saman við lágbræðslumark agarósa og dreift á smásjárgler til að mynda einsleitt lag.
- Frumulýsing: Glerunum er sökkt í lýsislausn til að fjarlægja frumuhimnuna og kjarnahimnuna og afhjúpa DNA.
- Rafskaut: Glerunum er komið fyrir í rafdrætti við basískar eða hlutlausar aðstæður. Skemmdir DNA bútar flytjast í átt að jákvæðu rafskautinu undir áhrifum rafsviðsins.
- Litun: Eftir rafdrætti eru glærurnar litaðar með flúrljómandi litarefni (td etídíumbrómíði) til að sjá DNA.
- Smásjágreining: Með því að nota flúrljómunarsmásjá eða sérhæfðan hugbúnað eru form halastjörnunnar greind og breytur eins og lengd hala og styrkleiki mældar.
Mynd úr biorender
Gagnagreining
Niðurstöður úr Comet Assay eru metnar út frá nokkrum lykilbreytum:
- Hala lengd: Táknar fjarlægðina sem DNA flytur, gefur til kynna umfang DNA skemmda.
- Halda DNA innihald: Hlutfall DNA sem flytur inn í hala, oft notað sem magnmæling á DNA skemmdum.
- Olive Tail Moment (OTM): Sameinar bæði halalengd og hala DNA innihald til að veita ítarlegri mælingu á DNA skemmdum.
Umsóknir
- Rannsóknir á erfðaeiturhrifum: Halastjörnugreiningin er mikið notuð til að meta áhrif efna, lyfja og geislunar á DNA frumna, sem gerir það að lykiltæki fyrir prófun á erfðaeiturhrifum.
- Umhverfis eiturefnafræði: Það hjálpar við að greina áhrif umhverfismengunarefna á DNA lífvera og veitir innsýn í öryggi vistkerfa.
- Læknisfræðilegar og klínískar rannsóknir: Halastjörnugreiningin er notuð til að rannsaka DNA viðgerðarkerfi, krabbamein og aðra DNA-tengda sjúkdóma. Það metur einnig áhrif krabbameinsmeðferða eins og geislameðferðar og lyfjameðferðar á DNA.
- Matvæla- og landbúnaðarvísindi: Notað til að meta öryggi skordýraeiturs, matvælaaukefna og annarra efna og til að rannsaka eituráhrif þeirra í dýralíkönum.
Kostir
- Mikil næmni: Fær um að greina lítið magn af DNA skemmdum.
- Einföld aðgerð: Tæknin er einföld, sem gerir hana hentuga fyrir skimun með miklum afköstum.
- Breitt forrit: Það er hægt að nota á ýmsar frumugerðir, þar á meðal dýra- og plöntufrumur.
- Magngreiningaráskoranir: Þrátt fyrir að veita eigindleg gögn um skemmdir á DNA, byggir megindleg greining að miklu leyti á hugbúnaði og myndgreiningartækni.
- Tilraunaskilyrði: Niðurstöður geta verið undir áhrifum af þáttum eins og rafdrættistíma og pH, sem krefjast nákvæmrar stjórnunar á tilraunaaðstæðum.
Takmarkanir
Halastjörnugreiningin er ómetanlegt tæki í líflæknisfræðilegum rannsóknum, umhverfisvísindum og lyfjaþróun vegna sveigjanleika þess og mikils næmis við að greina DNA skemmdir og viðgerðir. Beijing Liuyi líftækni Co. Ltd (Liuyi líftækni)býður upp á lárétt rafdráttarhólf fyrir halastjörnugreiningu. Velkomið að hafa samband við okkur til að ræða umHalastjarnaprófunsiðareglur.
Beijing Liuyi Líftækni Co. Ltd (Liuyi Líftækni) hefur sérhæft sig í framleiðslu á rafskautatækjum í meira en 50 ár með okkar eigin faglegu tækniteymi og R&D miðstöð. Við höfum áreiðanlega og fullkomna framleiðslulínu frá hönnun til skoðunar, og vöruhús, auk markaðsaðstoðar. Helstu vörur okkar eru Electrophoresis Cell (geymir/hólf), Electrophoresis Power Supply, Blue LED Transilluminator, UV Transilluminator, Gel Image & Analysis System o.fl. Við útvegum einnig rannsóknarstofutæki eins og PCR tæki, hvirfilblöndunartæki og skilvindu fyrir rannsóknarstofu.
Ef þú ert með einhverja innkaupaáætlun fyrir vörur okkar skaltu ekki hika við að hafa samband við okkur. Þú getur sent okkur skilaboð í tölvupósti[varið með tölvupósti]eða[varið með tölvupósti], eða vinsamlegast hringdu í okkur í +86 15810650221 eða bættu við Whatsapp +86 15810650221, eða Wechat: 15810650221.
Vinsamlegast skannaðu QR kóðann til að bæta við á Whatsapp eða WeChat.
Birtingartími: 20. september 2024