Grunntækni við rafskaut agarósuhlaups(1)

1. Flokkun

Gel rafdrætti er skipt í lóðréttar gerðir (þar á meðal súlugel og plötugel) og láréttar gerðir (aðallega plötugel) (Mynd 6-18). Almennt er lóðrétt aðskilnaður örlítið betri en lárétt, en lárétt hlaupframleiðsla hefur að minnsta kosti fjóra kosti: það er stuðningur undir öllu hlaupinu, sem gerir kleift að nota lágstyrk agarósa; það er hægt að útbúa agarósa hlaupplötur með mismunandi forskriftir; hlaup undirbúningur og hleðsla sýna eru þægilegri; rafskautshólfið er auðvelt að smíða og hagkvæmt. Þar sem lárétt rafdráttur er framkvæmd með agarósa hlaupplötuna að fullu á kafi um það bil 1 mm undir yfirborði rafdráttarjafnasins, er það einnig kallað rafskaut.

图片2

Rafskautsgeymir DYCP-31DN fyrir agarósa gel rafdrætti

2.Buffer System

Í kjarnsýruskilnaði taka flest kerfi upp samfelld kerfi. Algengt notaðir rafdrættisjafnarar eru TBE (0,08mól/L Tris·HCl, pH 8,5, 0,08mól/L bórsýra, 0,0024mól/L EDTA) jafnalausn og THE (0,04mól/L Tris·HCl, pH 7,8, 0,02mól/L natríumasetat, 0,0018mól/L EDTA) jafnalausn. Þessir stuðpúðar eru almennt útbúnir sem 10x stofnlausnir og þynntar í nauðsynlegan styrk þegar þeir eru í notkun. Flutningshraði línulegs og hringlaga DNA í agarósageli er breytilegur eftir jafnalausninni sem notaður er. Í THE biðminni er flutningshraði línulegs DNA meiri en hringlaga DNA, en í TBE jafnalausn er hið gagnstæða satt.

3

3.Undirbúningur Agarose Gel

(1) Undirbúningur á láréttu agarósageli

(a) Búðu til nauðsynlegan styrk af agarósageli með því að nota 1x rafdrættispúða.

(b) Hitið agarósan til að fullkomna upplausn annað hvort í sjóðandi vatnsbaði, á segulhræru eða í örbylgjuofni. Kælið agarósalausnina niður í 55°C og bætið etídíumbrómíði (EB) litarefni við í lokastyrk 0,5 μg/ml.

(c) Lokaðu brúnum gler- eða akrýlplatna með litlu magni af agarósageli, bættu við greiða og settu greiðutennurnar um 0,5~1,0 mm fyrir ofan plötuna.

(d) Hellið bræddu agarósagellausninni stöðugt í gler- eða akrýlplötumótið (þykktin fer eftir rúmmáli DNA sýnisins), forðastu að loftbólur berist. Látið það storkna náttúrulega við stofuhita.

(e) Fjarlægðu greiðann varlega eftir að hún hefur storknað. Bætið hæfilegu magni af rafdrættisbuffi í hlauptankinn og tryggið að hlaupplatan sé á kafi um það bil 1 mm undir yfirborði rafdrættispúðans.

(2) Undirbúningur á lóðréttu agarósageli

(a) Fjarlægðu fitu eða leifar af glerplötum með því að þvo með etanóli.

(b) Settu bilplötur á milli fram- og afturstíflna, taktu brúnir bilplötunnar við fram- og afturstíflurnar og festu þær með klemmum.

(c) Bætið 2% agarósa í 1x stuðpúða á milli brúna bilplötunnar til að mynda 1 cm háan agarósatappa neðst á hlaupsteypuhólfinu.

(d) Hellið bræddu agarósagelinu í æskilegum styrk, útbúið í 1x jafnalausn, í hlauphólfið allt að 1 cm fyrir neðan toppinn.

(e) Settu greiðann í, forðastu að festa loftbólur undir greiðutennunum. Stundum geta hrukkur komið fram við greiðutennurnar við kælingu agarósagel; í slíkum tilfellum skaltu einfaldlega bæta við bræddu agarósa efst til að storkna það.

(f) Fjarlægðu greiðann. Til að koma í veg fyrir að stuðpúði leki í hleðslu raufinni skaltu innsigla tenginguna milli agarósa hlaupplötunnar og rafskautshólfsins með 2% agarósa og bæta við nauðsynlegu magni af stuðpúða.

(g) Bætið 1x rafdrættisbuffi við hlauphólfið.

(h) Hlaðið DNA sýnum varlega á agarósa hlaupið undir jafnalausninni.

3

Frekari upplýsingar um grunnþekkingu á agarósa gel rafdrætti munum við deila í næstu viku. Óska eftir því að þessar upplýsingar séu gagnlegar fyrir tilraunina þína.

Beijing Liuyi Líftækni Co. Ltd (Liuyi Líftækni) hefur sérhæft sig í framleiðslu á rafskautatækjum í meira en 50 ár með okkar eigin faglegu tækniteymi og R&D miðstöð. Við höfum áreiðanlega og fullkomna framleiðslulínu frá hönnun til skoðunar, og vöruhús, auk markaðsaðstoðar. Helstu vörur okkar eru Electrophoresis Cell (tank/hólf), Electrophoresis Power Supply, Blue LED Transilluminator, UV Transilluminator, Gel Image & Analysis System o.fl.

Við erum nú að leita að samstarfsaðilum, bæði OEM rafdrættisgeymir og dreifingaraðilar eru velkomnir.

Ef þú ert með einhverja innkaupaáætlun fyrir vörur okkar skaltu ekki hika við að hafa samband við okkur. Þú getur sent okkur skilaboð í tölvupósti[varið með tölvupósti]eða[varið með tölvupósti], eða vinsamlegast hringdu í okkur í +86 15810650221 eða bættu við Whatsapp +86 15810650221, eða Wechat: 15810650221.

Vinsamlegast skannaðu QR kóðann til að bæta við á Whatsapp eða WeChat.

2


Pósttími: Des-07-2023